前臂肌腱损伤

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IF294艾迪基因LwaCas13a [复制链接]

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喜报频传!恭贺艾迪基因客户王硕老师(医院)在国际知名期刊《AdvancedMaterials》(IF=29.4),发表文章“TargetedMacrophageCRISPR-Cas13mRNAEditinginImmunotherapyforTendonInjury”,研究内容涉及使用艾迪基因产品--LwaCas13a

本研究不仅为CRISPR-Cas13在组织修复中的应用提供了新的思路和策略,还为肌腱损伤的治疗提供了新的可能性和前景。通过优化递送系统和设计ROS响应型释放机制,研究团队成功地实现了对巨噬细胞内特定mRNA的高效编辑,从而调节了巨噬细胞的功能并促进了肌腱组织的修复。

1.构建CRISPR-Cas13编辑系统

研究团队首先构建了Cas13核糖核酸蛋白复合物(Cas13RNP),这是CRISPR-Cas13编辑系统的核心组件。该复合物能够识别并切割特定的mRNA,从而实现基因编辑的目的。

2.筛选靶向巨噬细胞的递送系统

为了将Cas13RNP有效地递送到巨噬细胞中,研究团队筛选了一系列阳离子聚合物,这些聚合物具有靶向巨噬细胞的能力。通过系统筛选,他们找到了一种能够高效地将Cas13RNP导入巨噬细胞的递送系统。

3.设计ROS响应型释放机制

在急性肌腱损伤过程中,巨噬细胞会产生大量的活性氧(ROS)。研究团队利用这一特点,设计了一种ROS响应型释放机制,使Cas13RNP能够在ROS的作用下从递送系统中释放出来,从而实现对巨噬细胞内特定mRNA的编辑。

4.建立肌腱损伤模型

为了验证CRISPR-Cas13编辑系统在肌腱损伤治疗中的效果,研究团队建立了肌腱损伤模型。他们通过在肌腱损伤部位周围包裹含有Cas13RNP的复合膜,使Cas13RNP能够直接接触并编辑损伤部位的巨噬细胞。

5.观察和分析实验结果:

在实验过程中,研究团队定期观察和记录肌腱损伤部位的愈合情况、巨噬细胞的活性以及SPP1(OPN编码)的表达水平。实验结果显示,通过优化CRISPR-Cas13的递送系统并设计ROS响应型释放机制,研究团队成功地实现了对巨噬细胞内特定mRNA的高效编辑。在肌腱损伤模型中,Cas13RNP能够有效地抑制SPP1的过度表达,从而减轻巨噬细胞的活性并促进肌腱组织的修复。此外,实验还表明,通过包裹含有Cas13RNP的复合膜于肌腱损伤部位周围,可以显著减少成纤维细胞的激活和周围组织的粘连,进一步证实了CRISPR-Cas13编辑系统在肌腱损伤治疗中的有效性。

本研究为肌腱损伤的免疫治疗提供了一种新的策略,即通过CRISPR-Cas13系统进行RNA编辑,以调节巨噬细胞的功能,从而改善肌腱的修复过程。这为未来的临床应用提供了新的可能性,并为其他类型的组织损伤修复提供了新的思路。

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